Önümler

Proteom giň fosforilýasiýa hadysalarynyň seljermesi, belok fosforilasiýa torlarynyň çylşyrymlylygy sebäpli henizem esasy analitiki kynçylyk bolup durýar.Bu işde, fosfoproteomyň global seljermesine goşant goşmak ukybyna degişlilikde Lys-N, Lys-C we tripsiniň üstüni ýetirýäris.N-terminli asetilleşdirilen, fosforlyatirlenen we kodlanmadyk peptidleri netijeli bölmek üçin pes pH güýçli kation alyş-çalşygynyň arassalanan görnüşi ulanyldy.Jemi 5036 sany gereksiz fosfopeptid, üç fermentiň kombinasiýasyny ulanyp, 1 mg belokdan <1% ýalňyş tapyş derejesi bilen kesgitlenip bilner.Maglumatlarymyz, dürli proteazlar bilen döredilen fosfopeptid maglumatlar toplumynyň arasyndaky gapma-garşylygyň marginaldygyny, şuňa meňzeş döredilen iki sany triptiki maglumatlar toplumynyň arasyndaky gapma-garşylygyň azyndan 4 esse ýokarydygyny ýüze çykardy.Şeýlelik bilen, Lys-N we tripsiniň paralel ulanylmagy, diňe bir tripsin bilen deňeşdirilende ýüze çykarylan fosfopeptidleriň sanyny 72% ýokarlandyrmaga mümkinçilik berdi, tripsin köpeltmek tejribesi diňe 25% ýokarlanmagyna sebäp boldy.Şeýlelik bilen, diňe tripsin we Lys-N maglumatlaryna ünsi jemlänimizde, 4671 gereksiz fosfopeptid kesgitledik.Ectedüze çykarylan ýerleriň has giňişleýin seljermesi Lys-N we tripsin maglumatlar toplumynyň düýpgöter dürli fosforilýasiýa sebäplerinde baýlaşdyrylandygyny görkezdi, bu fosfoproteom seljermelerinde köproteazly çemeleşmeleriň örän möhümdigini subut etdi.