Daş töweregimizde adaty ýaly görünýän, ýöne aslynda sessiz-üýnsüz bize köp goşant goşýan gahrymanlar bar.Proteinase K, molekulýar diagnostika pudagynda “aýdylmadyk gahryman”, bu pudakdaky “uly we güýçli” bilen deňeşdirilende, K proteinase şeýle bir pesdir welin, onuň ähmiýetine köpden bäri üns bermedik.Täze täç epidemiýasynyň ýaýramagy bilen K proteinaza bolan isleg ýokarlandy we içerde we daşary ýurtda üpjünçilik sarp edilişden gaty yzda galdy we her kim birden K proteinazanyň şeýle möhümdigine düşündi.
Proteinaz K ulanylyşy näme?
Proteinase K, proteolitiki ferment işjeňligi bilen serin proteazdyr we dürli gurşawda (pH (4-12.5), ýokary duzly bufer, ýokary temperatura 70 ° C we ş.m.) işjeňligi saklap biler.Mundan başga-da, proteinase K-iň işjeňligi SDS, karbamid, EDTA, guanidin gidroklorid, guanidin izotiosýanat we ş.m. bilen päsgel bermeýär we belli bir mukdarda ýuwujy serişde proteinase K.-nyň işjeňligini güýçlendirip biler Lukmançylyk bejergisinde (wirus we mikrob dezinfeksiýa) ), iýmit (eti ýumşatmak), deri (saç ýumşatmak), çakyr öndürmek (alkogol arassalamak), aminokislotany taýýarlamak (zaýalanan ýelekler), nuklein kislotasyny çykarmak, situ gibridizasiýa we ş.m., proteinase K programmalar bar.Iň köp ulanylýan programma nuklein kislotasyny çykarmakdyr.
Proteinaza K, nusgadaky ähli beloklary, şol sanda nuklein kislotalary bilen berk baglanyşykly gistonlary fermentleşdirip biler, şeýlelik bilen nuklein kislotalary nusgadan çykarylyp, ekstraktlara goýberilip, indiki ädim we arassalama ädimini ýeňilleşdirer.Wirusly nuklein kislotasyny ýüze çykarmakda proteinase K wirus nusgasynyň ergininde möhüm komponentlerden biridir.Proteinase K, daşamak we ýüze çykarmak döwründe has ygtybarly wirusyň palta belogyny döwüp we hereketsizleşdirip biler;Mundan başga-da, proteinase K RNase peseldip biler, wirus RNK-nyň zaýalanmagynyň öňüni alar we nuklein kislotasynyň tapylmagyny aňsatlaşdyrar.
Proteinase K-iň bir gijeki şöhraty
Ylmy gözlegler ýa-da IVD ulgamynda bolsun, nuklein kislotasyny çykarmak iň esasy synag, şonuň üçin K proteinase hemişe örän möhüm barlykdy.Şeýle-de bolsa, geçmişde proteinase K rolundan has az tanalýardy.Munuň ep-esli bölegi proteinase K-iň üpjünçilik we isleg gatnaşygy gaty durnuklydy.Az adam K proteinase bilen üpjün etmekde kynçylyk çeker diýip pikir eder.
Täze täç epidemiýasynyň ýaýramagy bilen nuklein kislotasyny barlamaga isleg artdy.2020-nji ýylyň iýun aýynyň ahyryna çenli Hytaý 90 milliona golaý täze täç synagyny tamamlady we bu san dünýä derejesinde hasam aladalandyrýar.Nuklein kislotasyny çykarmak synaglarynda, proteinase K-iň iş konsentrasiýasy takmynan 50-200 μg / mL.Adatça, nuklein kislotasynyň nusgasyny almak üçin takmynan 100 μg proteinase K gerek.Hakyky ulanylanda, nuklein kislotasyny çykarmagyň netijeliligini ýokarlandyrmak üçin köplenç köp mukdarda K proteinasy ulanylar.Täze koronawirusyň nuklein kislotasyny tapmagy, köp mukdarda proteinase K islegini getirdi.Proteinaz K-iň asyl üpjünçiligi we isleg balansy çalt bozuldy we proteinase K bir gije epidemiýanyň öňüni alyş materialyna öwrüldi.
Proteinaz K öndürmekdäki kynçylyklar
Epidemiýanyň ösmegi bilen, K proteinaseazyň möhüm gymmaty adamlar tarapyndan bahalandyrylsa-da, K proteinazynyň aşa az açary sebäpli az sanly içerki kompaniýa K. proteinase önümçiligine gatnaşmagy utandyrýar. proteinase K önümçiligini döretmek isleýär Önümçilik döwründe K proteinaseazyň örän aýratyn belokdygy ýüze çykaryldy.Gysga wagtyň içinde proteinase K-iň önümçilik kuwwatyny giňeltmek gaty kyn.
Proteinaz K-iň uly önümçiligi aşakdaky kynçylyklar bilen ýüzbe-ýüz bolýar
1. Pes aňlatma
Proteinase K, beloklaryň köpüsini ýörite peseldip bilmeýär we öýjük öýjügine çynlakaý zäherlenmä sebäp bolup biler.Şonuň üçin K proteinaseazyň aňlatma derejesi, umuman, gaty pesdir.Proteinase K-ni ýokary derejede aňladýan aňlatma ulgamlaryny we ştamlaryny barlamak, adatça has uzyn sikl talap edýär.
2. Pigmentleriň we nuklein kislotalaryň galyndylary
Uly göwrümli fermentasiýa köp mukdarda pigment we öýjükli nuklein kislotasynyň galyndylaryny hödürleýär.Simpleönekeý arassalama prosesi bilen bu hapalary aýyrmak kyn we çylşyrymly arassalamak çykdajylary ýokarlandyrýar we dikeldiş tizligini peseldýär.
3. Durnuksyzlyk
Proteinase K ýeterlik derejede durnukly däl, özüni fermentläp bilýär we gorag serişdesi bolmazdan uzak wagtlap 37 ° C-de durnukly saklamak kyn.
4. Çökdürmek aňsat
Doňdurylan guradylan poroşokdaky K proteininiň düzüminiň köpdügini üpjün etmek üçin, proteinase K-iň doňan guradylan tozy taýýarlanylanda, ýokary konsentrasiýada doňan guradylan gorag serişdesini goşmaly, ýöne haçan proteinase K konsentrasiýasy 20mg / mL we ondan ýokary derejä ýetýär, bu aňsat, agregasiýa çökündi emele getirýär, bu bolsa gaty berk mazmunly proteinase K-nyň doňmagyna guratmakda uly kynçylyklar döredýär.
5. Uly maýa goýumlary
Proteinase K güýçli proteaz işjeňligine eýedir we laboratoriýadaky beýleki proteizleri gidroliz edip biler.Şonuň üçin proteinase K gözleg we ösüş we önümçilik üçin ýöriteleşdirilen önümçilik meýdanlaryny, enjamlaryny we işgärlerini talap edýär.
XD BIOCHEM-iň proteinase K ergini
XD BIOCHEM has a mature protein expression and purification platform, and has rich experience in the expression and purification of recombinant proteins and optimization of production processes. Through the rapid formation of a research and development team, the large-scale production process of proteinase K has been overcome. The monthly output of freeze-dried powder is more than 30 KG. The product has stable performance, high enzyme specific activity, and no host cytochrome and nucleic acid residues. Welcome to contact XD BIOCHEM Obtain a trial package (E-mail: sales@xdbiochem.com Tel: +86 513 81163739).
XD BIOCHEM-iň tehniki çözgütleri öz içine alýar
Köp göçürme plazmid integrasiýasyny ulanyp, 8g / L aňlatma derejesi bolan ýokary aňlatma ştamlary saýlanýar, bu bolsa proteinase K derejesiniň pes derejesini ýeňip geçýär;
Köp basgançakly arassalama prosesi arkaly, sitokrom we proteinase K-iň nuklein kislotasynyň galyndylary adaty bahadan üstünlikli aýryldy;
Gorag bufer formulalarynyň ýokary geçişli barlagy arkaly, K proteinazyny 37 ° C-de durnukly saklap bilýän bufer saýlandy;
Ekran buferleri, proteinase K-iň ýokary konsentrasiýalarda jemlenmegi we çökmegi aňsatlygy bilen baglanyşykly meseläni ýeňip geçýär we proteinase K-nyň ýokary gaty mazmuny doňdurmagy üçin esas döredýär.
XD BIOCHEM proteinase K nusgasy
XD BIOCHEM proteinase K durnuklylyk synagy: otag temperaturasynda 80 d-den soň işjeňlikde düýpli üýtgeşiklik bolmaz
XD BIOCHEM proteinase K durnuklylyk synagy: otag temperaturasynda 80 d-den soň işjeňlikde düýpli üýtgeşiklik bolmaz
XD BIOCHEM proteinase K-iň nuklein kislotasyny çykarmak täsirini we bäsdeş önümleri deňeşdirmek.Nuklein kislotasyny çykarmak prosesinde degişlilikde XD BIOCHEM we bäsleşige ukyply proteinase K ulanylýar.XD BIOCHEM proteinase K-iň çykaryş netijeliligi has ýokary we maksatly geniň Ct bahasy pesdir.
Iş wagty: 31-2021-nji dekabry