Önümler

Kolisin E1 kanal domeniniň membrana topologiýasy floresan rezonans energiýa geçirijisi (FRET) tarapyndan öwrenildi.FRET donor hökmünde genetiki taýdan kodlanan floresan aminokislotany (kumarin) we FRET kabul edijisi hökmünde DABMI (4- (dimetilamino) fenilazofenil-4'-menimid) bilen birleşdirilen saýlanan sistein galyndysyny öz içine aldy.Floresan kumarin galyndysy, ortogonal tRNA / aminoasil-tRNA sintetaza jübüti arkaly beloga goşuldy, bu kolisin kanalynyň çägindäki islendik sahypa saýlanyp alynmagyna mümkinçilik berdi.Her bir wariantda kumarin goşulmagy üçin duralga (TAG) mutasiýa we DABMI goşulmagy üçin sistein (TGT) mutasiýa bardy.1-6 gabyklaryň içindäki alty sany aralyk aralyk, hem ereýän hem-de membrana bagly ýagdaýlar üçin FRET derňewi arkaly kesgitlenildi.FRET maglumatlary, kanal domeniniň membrana bilen baglanyşykly gurluşy barada täze düşünje berýän membrana birleşiginde 3-6 gabyklaryň arasyndaky aralyk aralyklarda uly üýtgeşmeleri görkezdi.Umuman alanyňda, kolisin kanalynyň saýawan modeline esaslanyp, membrananyň baglanyşygy bilen coumarin-DABMI FRET interheliki netijeliligi peseldi.Kanal domeniniň ýapyk ýagdaýy üçin synag modeli häzirki we öň neşir edilen FRET maglumatlaryna esaslanyp işlenip düzüldi.Model, 1-nji, 6-njy, 7-nji we 10-njy helelleriň emele gelen merkezi transmembran saç çyzygynyň töwereginde 1, 6, 7 we 10-njy öýjükleriň daşardan we membrananyň interfeýs birleşmesinden sagat ugruna 1-7 sany tegelek tertipleşdirmegi teklip edýär.